VMA, HVA, 5-HIAA im Urin - HPLC

VMA, HVA, 5-HIAA im Urin - HPLC

Best.-Nr.: 1000/B
100 Tests
  • 5-Hydroxyindolessigsäure (5-HIAA)
  • Homovanillinsäure (HVA)
  • Vanillinmandelsäure (VMA)

Keine pH-Einstellung nötig
Für Screening automatisierbar
Auf Wunsch zwei interne Standards

Beschreibung

Klinische Relevanz

Das Neuroblastom ist eine neoplastische Erkrankung, die zu einer der häufigsten bösartigen Tumoren im Kindesalter gehört. Es handelt sich um neuroendokrine Tumore, bei denen die Betroffenen erhöhte Mengen an den Katecholaminmetaboliten Vanillinmandelsäure (VMA) und Homovanillinsäure (HVA) im Urin ausscheiden. Daher ist der Nachweis dieser Parameter bei der Neuroblastomdiagnose entscheidend.

Werden hingegen erhöhte Konzentrationen an Hydroxyindolessigsäure (5-HIAA) im Urin festgestellt, so ist dies ein Hinweis auf ein Karzinoid. Die bösartige Vermehrung von enterochromaffinen Zellen im Magen-Darm-Trakt führt zu einer gesteigerten Produktion des Gewebehormons Serotonin, dessen Hauptmetabolit 5-HIAA ist.

 

Produktvorteile

  • Einfache und sichere Probenvorbereitung
  • Auf Wunsch zwei interne Standards
  • Automatisierte Probenvorbereitung für Gilson® ASPECTM verfügbar

 

Dieser Kit ermöglicht die routinemäßige HPLC-Bestimmung von VMA, HVA und 5-HIAA im Urin. Die einfache und sichere Handhabung gewährleistet zuverlässige und reproduzierbare Ergebnisse. Für eine besonders hohe Präzision bei der 5-HIAA-Bestimmung steht optional ein weiterer interner Standard (HICA) zur Verfügung.

Chromatogramm

Technische Daten

Analysenmethode

HPLC

Anzahl der Bestimmungen

100

Parameter

5-Hydroxyindolessigsäure (5-HIAA), Homovanillinsäure (HVA), Vanillinmandelsäure (VMA)

Analysendauer

< 18 min

Bestimmungsgrenzen

VMA, HVA, 5-HIAA: 0,5 mg/l

Linearität

VMA: bis 78 mg/l
HVA: bis 51 mg/l
5-HIAA: bis 78 mg/l

Wiederfindungsrate

VMA: 70 %; HVA: 82 %; 5-HIAA: 66 %

Intraassay

VK < 4 %

Interassay

VK < 5 %

Säulentemperatur

Raumtemperatur (~25 °C)

Flussrate

1 ml/min

Probenmaterial

24-Stunden-Urin; ggf. Spontanurin (Urinausscheidung auf Kreatinin beziehen)

Präanalytik

VMA/HVA-Bestimmung

Urin über 10 ml 25%iger Salzsäure sammeln, pH < 4

 

5-HIAA-Bestimmung

Urin über 10 ml Eisessig sammeln, pH 4 - 6

Probenvorbereitung

  • Extraktion: 50 µl Urin + 1 ml Internal Standard (Puffergemisch, enthält iso-VMA) zusammengeben und mischen. Die Gesamtmenge auf die Probenvorbereitungssäule (Sample Clean Up Column) geben, Flüssigkeit durchsaugen oder zentrifugieren, Durchlauf verwerfen.
  • Waschen: 3 ml Wash Buffer I auf die Probenvorbereitungssäule geben, Durchlauf verwerfen. 2 mal 3 ml Wash Buffer II auf die Probenvorbereitungssäule geben, Durchlauf verwerfen.
  • Elution: 2,0 ml Elution Buffer auf die Probenvorbereitungssäule geben, Eluat sammeln. Zum Eluat 100 µl Finisher geben, kurz mischen.
  • 10 bis 20 µl in das HPLC-System injizieren.

Probenstabilität

VMA, HVA: bei +2 bis +8 °C mindestens 5 Tage. 5-HIAA: bei +2 bis +8 °C im Dunkeln maximal 3 Tage. Für längere Lagerung aliquotieren und unter -18 °C einfrieren.

Injektionsvolumen

10-20 µl

Zusätzliche Informationen

Für die HPLC-Analytik von VMA, HVA und 5-HIAA im Urin eignet sich jedes isokratische HPLC-System mit elektrochemischem Detektor.

Potential

ca. +760 mV

Hinweis

Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.

Kitkomponenten

Einzeln lieferbare Komponenten

Mobile Phase


Best.-Nr.: 1011

Calibration Standard


Best.-Nr.: 1003/B

Wash Buffer I


Best.-Nr.: 1005

Wash Buffer II


Best.-Nr.: 1006

Elution Buffer


Best.-Nr.: 1077

Finisher


Best.-Nr.: 1013

Kalibratoren

Einzeln lieferbare Kalibratoren

Kontrollen

Einzeln lieferbare Kontrollen