Beschreibung
Klinische Relevanz
Vitamin B6 umfasst Pyridoxin, Pyridoxamin und Pyridoxal sowie deren Phosphatderivate. Pyridoxal-5’-Phosphat (PLP) ist die aktive Coenzymform und an nahezu hundert enzymatischen Reaktionen beteiligt. Dazu gehören unter anderem die Synthese und der Abbau von Aminosäuren, die Verstoffwechselung von Aminosäuren zu Kohlenhydraten und der Fettsäuremetabolismus. Vitamin B6 ist außerdem bei der Weiterleitung von Neurotransmittern wie Serotonin und Dopamin erforderlich sowie bei der Biosynthese von bestimmten Porphyrinen. Der Bedarf an Vitamin B6 ist unter anderem von der Menge an konsumierten Proteinen abhängig.
Vitamin B6 kommt in vielen Nahrungsmitteln vor, so dass Mangelerscheinungen selten sind. Dennoch kann bei einseitiger Ernährung ein Mangel gemeinsam mit anderen wasserlöslichen Vitaminen auftreten. Dabei kann es zu einer Vielzahl an Symptomen kommen, wie Wachstumsstörungen, Anämien durch Störungen in der Häm-Synthese, chronische Entzündungen der Zunge oder Dermatitis. Es gibt auch viele Stoffwechselstörungen aufgrund eines Vitamin-B6-Mangels wie beispielsweise der Homocysteinämie.
Eine Überdosierung durch natürliche Nahrungsmittel ist praktisch nicht möglich und kommt daher nur bei übermäßiger Supplementierung vor. Sie führt dann zur Photosensitivität oder zu bestimmten Neuropathien. Bei Säuglingen sind auch Tachykardie und periphere Durchblutungsstörungen beschrieben.
Produktvorteile
- Bestimmung im Vollblut und Plasma/Serum möglich
- Einfache Handhabung
- Kosteneffizienz durch optimierte Kit-Zusammensetzung
Mit diesem Reagenzienkit für die HPLC wird PLP aus Vollblut einfach und sicher bestimmt. Die Probenvorbereitung beginnt mit einer effektiven Proteinfällung und der Abspaltung des proteinösen Holoenzyms. Durch anschließende Derivatisierung entsteht eine fluoreszierende PLP-Verbindung. Die chromatographische Messung erfolgt isokratisch mit Fluoreszenzdetektion.
Chromsystems bietet auch weitere Methoden mittels HPLC und UHPLC zur kombinierten Analytik von Vitamin B6 mit Vitamin B1 an.
Technische Daten
Analysenmethode
Anzahl der Bestimmungen
Parameter
Analysendauer
Bestimmungsgrenzen
Linearität
Wiederfindungsrate
Intraassay
Interassay
Probenmaterial
Präanalytik
Probenvorbereitung
- 200 μl Vollblut mit 300 μl Precipitation Reagent in lichtgeschütztem Reaktionsgefäß mischen.
- Mindestens 30 s vortexen.
- 10 min bei +4 °C inkubieren, anschließend 5 min bei 16 000 x g zentrifugieren.
- 250 μl des Überstandes in ein neues lichtgeschütztes Reaktionsgefäß überführen.
- 250 μl Neutralisation Reagent und anschließend 100 μl Derivatisation Reagent (cyanidhaltig) zugeben, kurz mischen.
- 20 min inkubieren bei 60 °C (Wasserbad).
- Anschließend Probe 10 min bei +4 °C abkühlen und 2 min bei 16 000 x g zentrifugieren.
- Überstand in lichtgeschütztes Autosamplergefäß überführen.
- 25–50 μl in das HPLC-System injizieren.
Probenstabilität
Zusätzliche Informationen
Für die HPLC-Analytik von Vitamin B6 eignet sich jedes gängige isokratische HPLC-System mit Fluoreszenz-Detektion.
Injektionsvolumen
Flussrate
Gradient
Säulentemperatur
Messwellenlänge
EX 320 nm
EM 415 nm
Hinweis
Kitkomponenten
Kalibratoren
Kontrollen
Produkt-Downloads
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