52752-F HPLC kit vitamin B1 vitamin B6 whole blood

Vitamin B1/B6 im Vollblut, vollautomatisierte Analyse - HPLC

Best.-Nr.: 52752/F
960 Tests
  • Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat)
  • Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Deutlich verringerter Arbeitsaufwand für die Probenvorbereitung
Präzise & schnelle Ergebnisse für beide Vitamine
Jeder Parameter durch einen spezifischen internen Standard abgesichert

Beschreibung

Klinische Relevanz

Vitamin B1 (Thiamin) spielt eine wichtige Rolle bei der Energiegewinnung aus Kohlenhydraten und Fetten. Die aktive Form ist das Thiaminpyrophosphat (TPP), ein Coenzym für einige enzymatische Reaktionen des Kohlenhydratstoffwechsels sowie für die Pyruvat-Decarboxylase. TPP ist außerdem beim oxidativen Glucoseabbau maßgeblich beteiligt. Die Bestimmung der Konzentration von TPP ist aussagekräftiger als Messungen des Gesamtthiamins, da so ausschließlich die physiologisch wirksame Form berücksichtigt wird.

Vitamin B6 umfasst Pyridoxin, Pyridoxamin und Pyridoxal sowie deren Phosphatderivate. Es wird über die Nahrung aufgenommen und über mehrere enzymatische Umwandlungen in die aktive Form Pyridoxal-5‘-Phosphat (PLP) überführt. PLP ist an nahezu hundert enzymatischen Reaktionen beteiligt, unter anderem als Cofaktor beim Aminosäurestoffwechsel sowie bei der Bildung des roten Blutfarbstoffs und von Neurotransmittern im Gehirn.

 

Produktvorteile

  • Automatisierte Probenvorbereitung für minimalen Arbeitsaufwand im Labor
  • Sichere und reproduzierbare Ergebnisse mit spezifischem internen Standard für jeden Parameter

 

Dieser HPLC-Kit ermöglicht die kombinierte Analytik von Vitamin B1 im Vollblut und B6 im Vollblut oder Plasma. Die Probenvorbereitung wird automatisiert in 96 Well-Filterplatten durchgeführt für maximalen Output und minimalen Arbeitsaufwand. Der interne Standard für jeden der beiden Parameter sowie spezielle Qualitätskontrollen gewährleisten eine präzise und sichere Quantifizierung.

Chromsystems bietet auch zwei Kits zur manuellen Bestimmung mittels HPLC an: eine Standardvariante sowie ein Kit zur vereinfachten Probenvorbereitung mit Pre-Mixed Tubes.

Alternativ gibt es auch eine automatisierte Methode mittels UHPLC.

Chromatogramm

Technische Daten

Analysenmethode

HPLC

Anzahl der Bestimmungen

960

Parameter

Vitamin B1 (TPP, Thiaminpyrophosphat), Vitamin B6 (PLP, Pyridoxal-5’-phosphat)

Analysendauer

9 min

Bestimmungsgrenzen

PLP 2,0 μg/l
TPP 7,0 μg/l

Linearität

PLP 500 μg/l
TPP 750 μg/l

Intraassay

Vk < 3 %

Interassay

Vk < 5 %

Probenmaterial

Vollblut

Probenvorbereitung

  • 100 μl Vollblut/Kalibrator/Kontrolle und 50 μl Internal Standard Mix in eine 96-Well-Collection Plate geben.
  • 150 μl Extraction Reagent zugeben und 4 min schütteln.
  • Niederschlag durch Zentrifugation abtrennen (3 min, 2000 x g).
  • 75 μl Überstand in eine 96 Well Filterplatte überführen.
  • 75 μl Prep Solution und 50 μl der Finisher-Lösung zugeben.
  • 30 s mischen.
  • Niederschlag durch Zentrifugation abtrennen (2,5 min, 1500 x g).
  • Den Überstand 45 min bei 60 °C inkubieren.
  • 100 μl Dilution Solution hinzufügen und kurz mischen (30 s).
  • Verschließen der Platte und Transfer zum Autosampler.

Probenstabilität

Die Haltbarkeit der Proben beträgt bei +2 bis +8 °C bis zu 1 Woche und unter -18 °C 2 Wochen. Proben vor Licht schützen.

Injektionsvolumen

25–50 μl

Flussrate

1,5–2,3 ml/min

Säulentemperatur

Raumtemperatur (~ 25°C)

Messwellenlänge

Start mit EX 320 nm, EM 415 nm
Nach ca. 3,8 min auf EX 367 nm, EM 435 nm umschalten

Hinweis

Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.

Kitkomponenten

Einzeln lieferbare Komponenten

Mobile Phase A


Best.-Nr.: 52001

Mobile Phase B


Best.-Nr.: 52022

Internal Standard Mix


Best.-Nr.: 52744

Extraction Reagent


Best.-Nr.: 52705

Prep Solution


Best.-Nr.: 52706

Finisher 1


Best.-Nr.: 52707

Finisher 2


Best.-Nr.: 52708

Dilution Buffer


Best.-Nr.: 52709

96-Well-Filterplatten


Best.-Nr.: 52057

96-Well-Auffangplatten


Best.-Nr.: 52058

HPLC-Säule


Best.-Nr.: 52100

Kalibratoren

Einzeln lieferbare Kalibratoren

Kontrollen

Einzeln lieferbare Kontrollen