Metanephrine im Urin - HPLC

Metanephrine im Urin - HPLC

Best.-Nr.: 2020
100 Tests
  • 3-Methoxytyramin
  • Metanephrin
  • Normetanephrin


Keine pH-Einstellung nach saurer Hydrolyse
Nur eine Probenvorbereitungssäule erforderlich
Sichere Abtrennung von Interferenzen

Beschreibung

Klinische Relevanz

Die biogenen Amine Normetanephrin, Metanephrin und 3-Methoxytyramin sind die Hauptmetabolite des Katecholaminstoffwechsels. Sie sind wichtige Parameter bei der Diagnose von bestimmten Tumoren des Nebennierenmarks wie Phäochromozytome, Neuroblastome, Ganglioneurome und Melanoblastome. Sie müssen zusätzlich zu Adrenalin, Noradrenalin, Dopamin, VMA und HVA bestimmt werden, um das Risiko falsch-positiver Ergebnisse zu reduzieren.

 

Produktvorteile

  • Nur eine Probenvorbereitungssäule erforderlich
  • Sichere Abtrennung von Interferenzen
  • Kombinierte Katecholamin/Metanephrin-Analytik im Urin möglich

 

Dieser Kit ermöglicht die zuverlässige routinemäßige HPLC-Bestimmung von Metanephrin, Normetanephrin und 3-Methoxytyramin im Urin. Mittels saurer Hydrolyse werden die konjugierten Metanephrine verlässlich freigesetzt. Der für die Festphasenextraktion erforderliche pH-Wert kann sehr einfach am Farbumschlag eines Indikators durch Zugabe des Neutralisation Buffer eingestellt werden. Die chromatographische Bestimmung erfolgt an einem isokratischen HPLC-System mit elektrochemischem Detektor. Die optimierte Trennsäule und mobile Phase gewährleisten dabei eine sichere Trennung möglicher Interferenzen.

 

Inhalt

Mobile Phase, 1000 ml
Calibration Standard, 10 ml
Internal Standard, 10 ml
Neutralisation Buffer, 300 ml
Wash Buffer, 250 ml
Elution Buffer, 250 ml
Sample Clean Up Columns, 100 pcs.

Chromatogramm

Technische Daten

Analysenmethode

HPLC

Anzahl der Bestimmungen

100

Parameter

3-Methoxytyramin, Metanephrin, Normetanephrin

Analysendauer

~ 14 min

Bestimmungsgrenzen

5 - 11 µg/l

Linearität

bis 5000 µg/l (Normetanephrin: bis 2500 µg/l)

Wiederfindungsrate

> 94 %

Intraassay

Vk < 3 %

Interassay

Vk < 4,4 %

Säulentemperatur

Raumtemperatur (~25 °C)

Flussrate

1,0-1,2 ml/min

Probenmaterial

24-Stunden-Urin (über 10 ml 25%iger Salzsäure sammeln); ggf. Spontanurin (Urinausscheidung auf Kreatinin beziehen).

Präanalytik

 

Probenvorbereitung

  • Saure Hydrolyse: 100 µl Internal Standard in Hydrolyseröhrchen vorlegen, 1 ml Urin zugeben, pH-Wert mit 2 N HCl auf 0,8 bis 1,0 einstellen. Das verschlossene Gefäß 30 Minuten bei 90 bis 100 °C inkubieren, danach sofort abkühlen.
  • Neutralisation: Hydrolysierte Probe mit 6 ml Neutralisation Buffer versetzen, wenn die Probe danach nicht violett gefärbt ist, 2N NaOH zusetzen, bis der Farbumschlag eintritt.
  • Extraktion: Gesamte Probe auf die Probenvorbereitungssäule (Sample Clean Up Column) geben, Durchlauf verwerfen.
  • Waschen: 10 ml dest. Wasser und anschließend 5 ml Wash Buffer auf die Probenvorbereitungssäule geben, Durchlauf jeweils verwerfen.
  • Elution: 5 ml Elution Buffer auf die Probenvorbereitungssäule geben, dabei das Eluat auffangen. Jedes Eluat gründlich mischen.
  • HPLC: 30 µl konz. Essigsäure pro ml Eluat zugeben, 20 µl des angesäuerten Eluats in das HPLC-System injizieren.

Probenstabilität

Bei +2 bis +8 °C mindestens 5 Tage. Für längere Lagerung aliquotieren und einfrieren.

Injektionsvolumen

20 µl

Zusätzliche Informationen

Für die Chromsystems HPLC-Analytik der Metanephrine im Urin eignet sich jedes isokratische HPLC-System mit elektrochemischem Detektor.

Potential

ca. +780 bis +840 mV

Hinweis

Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.

Kitkomponenten

Einzeln lieferbare Komponenten

Mobile Phase


Best.-Nr.: 2021

Calibration Standard


Best.-Nr.: 2023

Internal Standard


Best.-Nr.: 2024

Neutralisation Buffer


Best.-Nr.: 2025

Wash Buffer


Best.-Nr.: 2026

Elution Buffer


Best.-Nr.: 2027

Kalibratoren

Einzeln lieferbare Kalibratoren

Kontrollen

Einzeln lieferbare Kontrollen

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