93900 MassTox® Immunosuppressants ONEMinute Test - LC-MS/MS

MassTox® Immunsuppressiva im Vollblut – ONEMinute Test - LC-MS/MS

   
  • Cyclosporin A
  • Everolimus
  • Sirolimus
  • Tacrolimus

Best.-Nr.: 93900/400, 93900/1200
400 / 1200 Tests

Reduzierte Matrixeffekte durch Online Probenvorbereitung mittels Trap-Säulen-Technologie und isotopenmarkierte interne Standards
Hohe Empfindlichkeit und Spezifität

* Pflichtfelder

Beschreibung

Klinische Relevanz

Immunsuppressiva unterdrücken die Aktivität des Immunsystems, um so Abstoßungsreaktionen nach Organtransplantationen zu verhindern. Darüber hinaus werden sie bei Autoimmunerkrankungen als Medikamente eingesetzt. Für die Therapieüberwachung nach Organtransplantationen ist das therapeutische Drug-Monitoring unverzichtbar. Neben der Mycophenolsäure sind die am häufigsten nach Transplantation eingesetzten Immunsuppressiva Cyclosporin A (INN: Ciclosporin), Tacrolimus (FK506), Sirolimus und Everolimus. Cyclosporin A und Tacrolimus unterdrücken die für die Immunantwort erforderliche Signaltransduktion durch Hemmung von Calcineurin. Es steuert z.B. die Synthese von Interleukinen in den T-Zellen bei einer Immunantwort. Dagegen sind Sirolimus und dessen Derivat Everolimus calcineurin-unabhängig und hemmen mTOR (mammalian target of rapamycin), ein für die Signalübertragung wichtiges Enzym bei der Immunantwort.

Zur quantitativen Bestimmung dieser Immunsuppressiva sollte nur die LC-MS/MS eingesetzt werden, da immunologische Verfahren sich in Selektivität und Spezifität mitunter deutlich unterscheiden und teilweise auch unwirksame Metaboliten erfassen. Außerdem spielt bei der Analytik dieser Immunsuppressiva die Kompensation von Matrixeffekten eine entscheidende Rolle für die diagnostische Bestimmung aus Vollblut, einer komplexen Matrix. Zur genauen und sicheren Quantifizierung ist daher eine deutliche Reduzierung der Störungen unbedingt erforderlich.

 

Produktvorteile

  • Zuverlässige Eliminierung von Matrixeffekten
  • Hohe Empfindlichkeit und Spezifität
  • Sehr kurze Analysenzeit von 1-2 min
  • Optional: Automatisierte Probenvorbereitung

 

Der ONEMINUTE MassTox® Kit für die Analytik der vier Immunsuppressiva liefert robuste, präzise und reproduzierbare Ergebnisse – und das schon nach einer Laufzeit von 1-2 Minuten je Probe. Gerade für Labore mit einem großen Probendurchsatz ist die ONEMINUTE-Methode zeitsparend. Die manuelle Probenvorbereitung ist reduziert auf eine einfache und effektive Proteinfällung. Die Anreicherung der Analyte und Eliminierung weiterer Störsubstanzen erfolgt ONLINE über eine Trap-Säule, mit der Matrixeffekte drastisch minimiert werden. Isotopenmarkierte interne Standards kompensieren verbleibende Ionensuppression vollständig. Über ein einfaches Säulenschaltsystem ist die Trap-Säule mit der HPLC-Säule und dem MS/MS-System verbunden. Der zusätzliche Einsatz von 6PLUS1® Multilevel-Kalibratoren und der MassCheck®-Kontrollen gewährleistet eine hohe Genauigkeit der Ergebnisse.

Ergänzend ist diese Analytik auch als automatisierte Methode erhältlich, die vollständig für alle gängigen Tandem-Massenspektrometer validiert ist.

Außerdem gibt es von Chromsystems auch eine Standardmethode zur Bestimmung der Immunsuppressiva im Vollblut (Best.-Nr. 93000).

 

Inhalt 93900/400                             

Mobile Phase A, 900 ml                     
Mobile Phase B, 450 ml                      
Precipitation Reagent, 100 ml                 
Internal Standard Set, 1 box                
Extraction Buffer, 40 ml           
Rinsing Solution, 1000 ml          
Reaktionsgefäße, transparent, 4 x 100 Stück       

 

Inhalt 93900/1200

Mobile Phase A, 5 x 900 ml                     
Mobile Phase B, 3 x 450 ml                
Precipitation Reagent, 3 x 100 ml                 
Internal Standard Set, 3 x 1 box              
Extraction Buffer, 3 x 40 ml        
Rinsing Solution, 2 x 1000 ml            
Reaktionsgefäße, transparent, 12 x 100 Stück   
Analytische Säule, 1 Stück          
Trap-Säule, 2 Stück                  
6PLUS1® Multilevel Calibrator Set Immunosuppressants (XL), 7 x 2 ml     

Chromatogramm

Technische Daten

Analysenmethode

LC-MS/MS

Parameter

Cyclosporin A, Everolimus, Sirolimus, Tacrolimus

Analysendauer

1-2 min (systemabhängig)

Bestimmungsgrenzen

Cyclosporin A: < 5.0 µg/l
Everolimus: < 0.5 µg/l
Sirolimus: < 0.5 µg/l
Tacrolimus: < 0.5 µg/l

Linearität

Cyclosporin A: bis zu 2000 µg/l
Everolimus: bis zu 100 µg/l
Sirolimus: bis zu 100 µg/l
Tacrolimus: bis zu 100 µg/l

Information

Dieses Chromsystems-Produkt ist vollständig validiert. Eine nutzerseitige Validierung kann entfallen. Bitte entnehmen Sie die gerätespezifischen Validierungsdaten der Arbeitsvorschrift.

Probenmaterial

Vollblut

Präanalytik

Patientenproben sind bei +2 bis +8 °C bis zu 7 Tage haltbar.

Probenvorbereitung

  • 50 µl Probe/Kalibrator/MassCheck® Kontrolle in einem Reaktionsgefäß vorlegen
  • 25 µl vom rekonstituierten Internal Standard Mix zugeben
  • 100 µl Extraction Buffer zugeben
  • 250 µl Precipitation Reagent zugeben und 1 min vortexen und anschließend für 2 min bei Raumtemperatur inkubieren
  • 5 min bei 15000 x g zentrifugieren
  • Überstand in ein Autosampler-Vial überführen und 5 bis 50 µl des Probenextrakts in das LC-MS/MS-System injizieren

 

Probenstabilität

bis zu 7 Tage bei +2 bis 8°C

Injektionsvolumen

5–50 µl

Ionisation

ESI positiv

MS/MS-Modus

MRM

Hinweis

Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.

Kitkomponenten

Einzeln lieferbare Komponenten

Mobile Phase A


Best.-Nr.: 93911

Mobile Phase B


Best.-Nr.: 93922

Precipitation Reagent


Best.-Nr.: 93003

Rinsing Solution


Best.-Nr.: 93909

Internal Standard Set


Best.-Nr.: 93946

Extraction Buffer


Best.-Nr.: 93005

Kalibratoren

Einzeln lieferbare Kalibratoren

Kontrollen