57000 newborn screening amino acid acyl carnitines from dried blood

MassChrom® Aminosäuren und Acylcarnitine aus Trockenblut / Non Derivatised - LC-MS/MS

Best.-Nr.: 57000
960 Tests
  • Acylcarnitine & freies Carnitin
  • Aminosäuren

Probenvorbereitung ohne Derivatisierung der Analyten
Mit 96-Well-Platten

Beschreibung

Klinische Relevanz

Ziel des Neugeborenen-Screenings (NBS) ist das frühzeitige Erkennen angeborener Stoffwechselstörungen, bevor diese zu Schäden am Organismus führen. Darunter fallen Störungen des Aminosäurestoffwechsels wie der Phenylketonurie (PKU) und der Ahornsirup-Krankheit (MSUD), Störungen des Fettsäurestoffwechsels sowie Organoazidurien (Isovalerianazidämie). Werden diese Krankheiten nicht diagnostiziert, so können diese Stoffwechselstörungen bereits in den ersten Lebenstagen zu schweren irreversiblen Schäden bei Neugeborenen führen.

Die Massenspektrometrie ist dabei die Methode der Wahl: sie erlaubt die Erfassung eines breiten Spektrums an Stoffwechseldefekten in einem einzigen Lauf. Durch die hohe Selektivität der LC-MS/MS kann auch auf eine HPLC-Säule verzichtet werden. Damit ist eine sehr präzise Quantifizierung in einer sehr kurzen Analysenzeit von unter 2 Minuten möglich.

 

Produktvorteile

  • Einfache SUAC-Bestimmung mit dem Upgrade-Set
  • Screening von vielen Stoffwechselstörungen in einem einzigen Lauf, z.B. Phenylketonurie (PKU), Ahornsirupkrankheit (MSUD) und Tyrosinämie Typ I
  • Je ein eigener interner Standard pro Analyt 

 

Dieser Chromsystems Kit erlaubt eine schnelle und zuverlässige Bestimmung von Aminosäuren, Acylcarnitinen und Succinylaceton aus Trockenblut im Rahmen des Neugeborenen-Screenings von Aminosäure- und Fettsäurestoffwechselstörungen mittels Tandem-Massenspektrometrie. Die Probenvorbereitung basiert auf einer effektiven Extraktion der Analyten aus dem Blood Spot ohne zusätzliche Aufarbeitungsschritte. Um eine sichere und präzise Quantifizierung der Analyten zu gewährleisten, verwendet die Methode stabile isotopenmarkierte interne Standards für die Kalibrierung und Messung.

Ergänzend steht Ihnen zur Analytik von Succinylaceton ein Upgrade Set zur Verfügung (Best.-Nr. 57111).

Hier geht‘s zur Übersicht aller unserer Assays zum Neugeborenen-Screening.

Technische Daten

Analysenmethode

LC-MS/MS

Anzahl der Bestimmungen

960

Parameter

Acylcarnitine & freies Carnitin, Aminosäuren

Analysendauer

< 2 min

Bestimmungsgrenzen

Aminosäuren mit SUAC: 0,5-12 µmol/l
(Acyl-)Carnitine: 0,01-1,9 µmol/l

Linearität

Aminosäuren mit SUAC: 120-7000 µmol/l
(Acyl-)Carnitine: 15-400 µmol/l

Wiederfindungsrate

Aminosäuren mit SUAC: 41-119 %; (Acyl-)Carnitine: 89-103 %

Intraassay

Aminosäuren mit SUAC: VK = 2-10 %
(Acyl-)Carnitine: VK = 3-8 %

Interassay

Aminosäuren mit SUAC: VK = 4,3-10 %
(Acyl-)Carnitine: VK = 4,3-10,8 %

Cutoff-Werte

Aminosäuren 35–1000 µmol/l
freies Carnitin ca. 55 µmol/l
Acylcarnitine 0,2–73 µmol/l
SUAC 1,2 µmol/l

Information

Massenübergänge der Analyte und internen Standards

Aminosäuren und SUAC MRM
Alanin 90 > 44
Alanin-D4 94 > 48
Arginin 175 > 70
Arginin-D7 182 > 77
Asparaginsäure 134 > 116
Asparaginsäure-D3 137 > 119
Citrullin 176 > 113
Citrullin-D2 178 > 115
Glutaminsäure 148 > 130
Glutaminsäure-D5 153 > 135
Glycin 76 > 30
Glycin-13C2-15N 79 > 32
Leucin 132 > 86
Leucin-D3 135 > 89
Methionin 150 > 133
Methionin-D3 153 > 136
Ornithin 133 > 70
Ornithin-D6 139 > 76
Phenylalanin 166 > 120
Phenylalanin-D5 171 > 125
Prolin 116 > 70
Prolin-D7 123 > 77
Tyrosin 182 > 136
Tyrosin-D4 186 > 140
Valin 118 > 72
Valin-D8 126 > 80
SUAC 155 > 137
SUAC-13C5 160 > 142
Acylcarnitine und freies Carnitin MRM
Carnitin 162 >85
Carnitin-D9 171 > 85
C2-Carnitin 204 > 85
C2-Carnitin-D3 207 > 85
C3-Carnitin 218 > 85
C3-Carnitin-D3 221 > 85
C4-Carnitin 232 > 85
C4-Carnitin-D3 235 > 85
C5-Carnitin 246 > 85
C5-Carnitin-D9 255 > 85
C5DC-Carnitin 276 > 85
C5DC-Carnitin-D6 282 > 85
C6-Carnitin 260 > 85
C6-Carnitin-D3 263 > 85
C8-Carnitin 288 > 85
C8-Carnitin-D3 291 > 85
C10-Carnitin 316 > 85
C10-Carnitin-D3 319 > 85
C12-Carnitin 344 > 85
C12-Carnitin-D3 347 > 85
C14-Carnitin 428 > 85
C14-Carnitin-D3 375 > 85
C16-Carnitin 400 > 85
C16-Carnitin-D3 403 > 85
C18-Carnitin 428 > 85
C18-Carnitin-D3 431 > 85

Flussrate

20–600 µl/min

Probenmaterial

Trockenblut

Präanalytik

Probenentnahme: Blut aus der Ferse des Neugeborenen direkt auf eine Filterkarte geben. Entnahme zwischen 24. und 72. Lebensstunde, abhängig von der nationalen Richtlinie.

Probenstabilität: Lagerung bei niedriger Feuchtigkeit (< 30 %) und Raumtemperatur ausreichend, wenn die Analyse innerhalb von 24 bis 48 Stunden durchgeführt wird. Für eine längere Lagerung die Proben unter Feuchtigkeitsschutz tiefgefroren unter -18 °C aufbewahren.

Probenvorbereitung

  • 3,2 mm Blood Spot aus den Filterkarten in eine 96-Well-Platte ausstanzen.
  • 100 μl Internal Standard hinzufügen und 20 min schwenken.
  • Überstand in eine neue 96-Well-Platte überführen (oder bei 57000/F 2 min zentrifugieren).
  • Bis zu 10 μl in das LC-MS/MS-System injizieren.

 

In der Probenvorbereitung zur Analytik von Succinylaceton müssen folgende zusätzlichen Schritte vor der Injektion durchgeführt werden: Internal Standard und Extraction Buffer zugeben, 30 min schütteln, Extrakte vereinigen (pipettieren), 20 min inkubieren

Für mehr Details siehe Arbeitsvorschrift.

Injektionsvolumen

<= 10 µl

Autosampler-Spüllösung

Rinsing Solution (57007)

MS/MS-Modus

MRM

Zusätzliche Informationen

Es ist keine HPLC-Säule erforderlich.

Hinweis

Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.

Kitkomponenten

Kontrollen