Homocystein im Serum/Plasma - HPLC

Homocystein im Serum/Plasma - HPLC

Best.-Nr.: 45000
200 Tests
  • Homocystein

Schnelle Probenvorbereitung
Kurze Analysenzeit
Standzeit der HPLC-Säule für mehr als 2000 Trennungen
Geeignet für alle Blutabnahmesysteme

Beschreibung

Klinische Relevanz

Homocystein (Hcy) ist eine nicht-proteinogene Aminosäure, die bei der Demethylierung der Aminosäure Methionin entsteht. Hierbei sind einige Enzyme involviert, die Cofaktoren wie Vitamin B6 und Vitamin B12 benötigen. Bei einem Mangel dieser Cofaktoren kommt es zu einem Anstieg der Hcy-Konzentration, aber auch angeborene genetische Veränderungen können dafür verantwortlich sein.

Bereits moderat erhöhte Hcy-Werte sind ein Risikofaktor für Herz-Kreislauferkrankungen, Arteriosklerose und koronare Herzkrankheiten. Erhöhte Hcy-Werte werden auch bei der Homocystinurie festgestellt, einer angeborenen genetischen Veränderung, bei der Enzyme für die Verstoffwechslung fehlen oder nur in zu geringen Mengen zur Verfügung stehen. Hier haben bereits Neugeborene erhöhte Hcy-Werte, rechtzeitig aufgedeckt ist die Erkrankung jedoch behandelbar. Das Neugeborenenscreening (NBS) auf Homocystinurie ist daher in einigen europäischen Ländern, wie in Irland, Pflicht, in Deutschland nur im Rahmen eines erweiterten NBS und vereinzelt in Verdachtsfällen.

 

Produktvorteile

  • Schnelle Probenvorbereitung
  • Kurze Analysenzeit
  • Mehr als 2000 Trennungen mit einer HPLC-Säule
  • Geeignet für alle Blutabnahmesysteme

 

Mit diesem Kit wird das Gesamthomocystein einfach und zuverlässig im Serum/Plasma bestimmt. Dabei beschränkt sich die Probenvorbereitung auf die Freisetzung des proteingebundenen Homocysteins und einem Fällungsschritt mit anschließender Derivatisierung. Die chromatographische Trennung erfolgt auf einem isokratischen HPLC-System mit Fluoreszenz-Detektion. Unabhängig des Blutabnahmesystems erlauben die aufeinander abgestimmten Reagenzien eine sichere und verlässliche Quantifizierung von Homocystein innerhalb einer kurzen Analysenzeit von weniger als 6 Minuten.

Chromatogramm

Technische Daten

Analysenmethode

HPLC

Anzahl der Bestimmungen

200

Parameter

Homocystein

Analysendauer

5,5 min

Bestimmungsgrenzen

0,4 µmol/l

Linearität

bis 400 µmol/l

Wiederfindungsrate

96–99 %

Intraassay

VK = 0,9– 2,2 %

Interassay

VK = 2,9–3,1 %

Probenmaterial

Serum/Plasma

Präanalytik

Probennahme venös nüchtern. Wenn keine speziellen Homocystein-Blutabnahmesysteme verwendet werden, das Plasma/Serums innerhalb von 45 min nach der Blutabnahme herstellen. Im Plasma bei Raumtemperatur 24 h, bei +4 °C bis zu 7 Tage und unter -18 °C einige Monate haltbar.

Probenvorbereitung

  • 100 µl Plasma/Serum, 25 µl Internal Standard und 75 µl Reduction Reagent zusammengeben.
  • 2 s auf schütteln (Vortex) und 10 min bei Raumtemperatur inkubieren.
  • 100 µl Precipitation Reagent zugeben.
  • 30 s schütteln (Vortex).
  • 5 bis 7 Minuten bei 9000 x g zentrifugieren.
  • In separatem Reaktionsgefäß 100 µl Derivatisierungslösung vorlegen.
  • 50 µl Überstand der Zentrifugation, gut durchmischen.
  • 10 min bei +50 bis +55 °C inkubieren danach sofort abkühlen.
  • 20 bis 50 µl in das HPLC-System injizieren.

Probenstabilität

Die vorbereiteten Proben sind bei Raumtemperatur max. 20 h, bei +2 bis +8 °C 5 Tage und unter -18 °C bis zu 3 Wochen haltbar.

Zusätzliche Informationen

Es eignet sich jedes isokratische HPLC-System mit Fluoreszenz-Detektor.

Injektionsvolumen

20–50 µl

Flussrate

1,3 bis 1,7 ml/min

Gradient

isokratisch

Säulentemperatur

Raumtemperatur (~ 25 °C)

Messwellenlänge

EX 385 nm
EM 515 nm

Hinweis

Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.

Kitkomponenten

Einzeln lieferbare Komponenten

Kalibratoren

Einzeln lieferbare Kalibratoren

Kontrollen

Einzeln lieferbare Kontrollen