68000 HPLC kit coenzyme Q10 ubiquinone serum plasma whole blood

Coenzym Q10 im Serum/Plasma/Vollblut - HPLC

Best.-Nr.: 68000
100 Tests
  • Coenzym Q10

Keine Flüssig-Flüssig-Extraktion
Kein Eindampfschritt
Stabile Kalibratoren und Kontrollen

Beschreibung

Klinische Relevanz

Coenzym Q10 (Ubichinon, Q-10 oder UQ) ist strukturell mit Vitamin E verwandt und ist in vielen Organismen Bestandteil der mitochondrialen Atmungskette. Es ist für die zelluläre Energieproduktion essentiell und wirkt darüber hinaus im Körper antioxidativ. Coenzym Q10 wird mit der Nahrung aufgenommen, kann aber auch im menschlichen Körper produziert werden. Aufgrund des hohen Energieumsatzes weisen Herz, Lunge und Leber besonders hohe Q10-Konzentrationen auf. Ein Mangel ist selten, kann aber bei Muskelerkrankungen (Myopathien) auftreten und ist dann therapiebedürftig. Es wird angenommen, dass ein Mangel an Q10 eine Ursache für Herz-Kreislauf-Erkrankungen sein könnte.

 

Produktvorteile

  • Keine Flüssig-Flüssig-Extraktion
  • Kein Eindampfschritt
  • Stabile Kalibratoren und Kontrollen

 

Dieser Chromsystems-Kit erlaubt die sichere chromatographische Bestimmung von Coenzym Q10 in einem isokratischen HPLC-Lauf mit UV-Detektion. Coenzym Q10 wird zuerst durch Proteinfällung freigesetzt und anschließend durch eine Festphasenextraktion aufkonzentriert. Eine Extraktion des Plasmas mit neurotoxischem Hexan und das Eindampfen von Überständen wird damit vermieden. Zur sicheren Quantifizierung wird ein stabiler interner Standard verwendet. Die separat erhältlichen Qualitätskontrollen sind humanmatrix-basierend und nach strengen Anforderungen hergestellt.

Chromatogramm

Technische Daten

Analysenmethode

HPLC

Anzahl der Bestimmungen

100

Parameter

Coenzym Q10

Analysendauer

< 15 Min

Bestimmungsgrenzen

20 µg/l

Linearität

bis 20 000 µg/l

Wiederfindungsrate

90 %

Intraassay

Vk = 5 %

Interassay

Vk = 6 %

Information

Für die HPLC-Analytik von Coenzym Q10 eignet sich jedes isokratische HPLC-System mit UV-Detektor.

Probenmaterial

Plasma/Serum/Vollblut

Präanalytik

Proben gekühlt versenden.

Probenvorbereitung

Plasma/Serum

  • 500 µl Plasma/Serum und 250 µl Internal Standard im lichtgeschützten Reaktionsgefäß kurz mischen.

  • 500 µl Precipitation Reagent 1 zugeben und 30 sec vortexen.

  • 10 min bei +2 bis +8 °C inkubieren.

  • 5 min bei 15000 x g zentrifugieren. Es ist nicht nötig, den Überstand in ein neues Reaktionsgefäß zu überführen!

  • 100 µl Precipitation Reagent 2 zugeben und 30 sec vortexen.

  • Sofort 10 min bei 15000 x g zentrifugieren.

  • Den bei der Fällung erhaltenen Überstand vollständig auf die beschriftete Probenvorbereitungssäule geben und zügig durchzentrifugieren (2 min bei 700 x g) oder durchsaugen, Durchlauf verwerfen.

  • 500 µl Wash Buffer 1 durch die Säule zentrifugieren (1 min bei 700 x g) oder durchsaugen, Durchlauf verwerfen.

  • 160 µl Wash Buffer 2 durch die Säule zentrifugieren (2 min bei 700 x g) oder durchsaugen, Durchlauf verwerfen.

  • 250 µl Elution Buffer durch die Probenvorbereitungssäule in ein beschriftetes, lichtgeschütztes Auffanggefäß (z. B. Autosampler-Vial) zentrifugieren (2 min bei 700 x g) oder durchsaugen.

  • 50 µl Eluat in das HPLC-System injizieren.

Vollblut

  • 250 µl kaltes HPLC-Wasser im lichtgeschützten Reaktionsgefäß vorlegen, 250 µl Vollblut zugeben und kurz mischen. Zur vollständigen Überführung des Vollbluts die Pipettenspitze mehrmals nachspülen.

  • 250 µl Internal Standard zugeben und kurz mischen.

  • 500 µl Precipitation Reagent 1 zugeben und 30 sec vortexen.

  • 10 min bei +2 bis +8 °C inkubieren.

  • 5 min bei 15000 x g zentrifugieren. Es ist nicht nötig, den Überstand in ein neues Reaktionsgefäß zu überführen!

  • 100 µl Precipitation Reagent 2 zugeben und 30 sec vortexen.

  • Sofort 10 min bei 15000 x g zentrifugieren.

  • Den bei der Fällung erhaltenen Überstand vollständig auf die beschriftete Probenvorbereitungssäule geben und zügig durchzentrifugieren (2 min bei 700 x g) oder durchsaugen, Durchlauf verwerfen.

  • 500 µl Wash Buffer 1 durch die Säule zentrifugieren (1 min bei 700 x g) oder durchsaugen, Durchlauf verwerfen.

  • 160 µl Wash Buffer 2 durch die Säule zentrifugieren (2 min bei 700 x g) oder durchsaugen, Durchlauf verwerfen.

  • 250 µl Elution Buffer durch die Probenvorbereitungssäule in ein beschriftetes, lichtgeschütztes Auffanggefäß (z. B. Autosampler-Vial) zentrifugieren (2 min bei 700 x g) oder durchsaugen.

  • 50 µl Eluat in das HPLC-System injizieren.

Probenstabilität

Die Haltbarkeit der Proben beträgt bei +2 bis +8 °C bis zu 4 Tage. Für eine längere Lagerung sollten die Proben tiefgefroren unter -18 °C aufbewahrt werden.

Zusätzliche Informationen

Für die HPLC-Analytik von Coenzym Q10 eignet sich jedes isokratische HPLC-System mit UV-Detektor.

Injektionsvolumen

20 µl Plasma/Serum; 50 µl Vollblut

Flussrate

2,5 ml/min

Fluss

2,5 ml/min

Gradient

Isokratisch

Säulentemperatur

Raumtemperatur (~25 °C)

Messwellenlänge

275 nm

Hinweis

Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.

Kitkomponenten

Einzeln lieferbare Komponenten

Mobile Phase


Best.-Nr.: 68001

Internal Standard


Best.-Nr.: 68004

Precipitation Reagent 1


Best.-Nr.: 68005

Precipitation Reagent 2


Best.-Nr.: 68006

Wash Buffer 1


Best.-Nr.: 68007

Sample Clean Up Columns


Best.-Nr.: 68008

Wash Buffer 2


Best.-Nr.: 68009

Elution Buffer


Best.-Nr.: 68010

Reaktionsgefäße


Best.-Nr.: 33005

Kalibratoren

Einzeln lieferbare Kalibratoren

Kontrollen

Einzeln lieferbare Kontrollen