25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC

25-OH-Vitamin D3/D2 im Serum/Plasma - HPLC

Best.-Nr.: 38038
100 Tests
  • 25-OH-Vitamin D2
  • 25-OH-Vitamin D3

Kombinierte Analytik von Vitamin D3 und D2
Verbesserte Trennung
Qualitätskontrollen und Kalibrator erhältlich

Beschreibung

Klinische Relevanz

Vitamin D (Cholecalciferol, Colecalciferol oder kurz Calciol) ist eine anerkannte klinisch-chemische Messgröße im Zusammenhang mit Osteoporose und Osteopenie (Minderung der Knochendichte). Darüber hinaus spielt es eine Rolle bei der Immunantwort, bei kardiovaskulären Erkrankungen und bestimmten Krebsarten. Daher ist die Diagnostik von Vitamin D aus unterschiedlicher Sicht von großer Bedeutung.

25-OH-Vitamin D3 ist der Hauptmetabolit im menschlichen Organismus und direkte Vorstufe der physiologisch aktiven Form 1,25-(OH)2-Vitamin D3. Vitamin-D-Mangel wird in erster Linie durch Nahrungsergänzung mit Vitamin D3 oder Vitamin D2 therapiert. Vitamin D2 ist synthetisch einfacher herzustellen und als Supplement außerhalb der EU und vor allem in den USA verbreitet. Daher ist seine Bestimmung im Serum/Plasma ebenfalls relevant.

 

Produktvorteile

  • Kombinierte Analytik von Vitamin D3 und D2
  • Zuverlässige Trennung
  • Sichere Quantifizierung mit stabilem internen Standard

 

Dieser Kit von Chromsystems erlaubt die sichere und simultane chromatographische Bestimmung von 25-OH-Vitamin D3 und 25-OH-Vitamin D2 in einem isokratischen HPLC-Lauf mit UV-Detektion. Durch eine effektive Proteinfällung und eine selektive Festphasenextraktion werden störende Komponenten abgetrennt. Zur sicheren Quantifizierung wird als stabiler interner Standard ein nicht-physiologisches Vitamin D-Derivat verwendet. So werden mit niedrigem Zeit- und Kostenaufwand reproduzierbare und zuverlässige Ergebnisse erzielt.

Chromsystems bietet alternativ für hohen Probendurchsatz eine Online-Methode mit selektiver Online-Festphasenextraktion an (Best.-Nr. 38900/1000) sowie Methoden zur Bestimmung mittels Massenspektrometrie (Best.-Nr. 62000).

Chromatogramm

Technische Daten

Analysenmethode

HPLC

Anzahl der Bestimmungen

100

Parameter

25-OH-Vitamin D2, 25-OH-Vitamin D3

Analysendauer

10 min

Bestimmungsgrenzen

1,1 µg/l - 1,4 µg/l

Linearität

bis mind. 250 µg/l

Wiederfindungsrate

25-OH-Vitamin D3: 86 %; 25-OH-Vitamin D2: 87 %

Intraassay

25-OH-Vitamin D3: Vk 3.0 %
25-OH-Vitamin D2: Vk 1,8 %

Interassay

25-OH-Vitamin D3: Vk 3,3 %
25-OH-Vitamin D2: Vk 4,6 %

Säulentemperatur

ca. 25 °C

Flussrate

0,7 ml/min

Probenmaterial

Serum/Plasma

Probenvorbereitung

  • 500 µl Serum/Plasma und 50 µl Internal Standard in lichtgeschütztem Reaktionsgefäß kurz mischen.
  • 500 µl Precipitation Reagent zugeben, 20 s vortexen.
  • 10 Minuten auf +4 °C abkühlen.
  • 5 Minuten bei 13 000 U/min zentrifugieren.
  • Probenüberstand vollständig auf die Probenvorbereitungssäule geben, durchzentrifugieren/-saugen, Durchlauf verwerfen.
  • 2 x 1 ml Wash Buffer 1 durch die Probenvorbereitungssäule zentrifugieren/-saugen, Durchläufe verwerfen.
  • 75 µl Wash Buffer 2 durch die Probenvorbereitungssäule zentrifugieren/-saugen, Durchlauf verwerfen.
  • 25-OH-Vitamin D3 und D2 mit 200 µl Elution Buffer eluieren und mit 20 µl dest. Wasser verdünnen.
  • 25 µl Eluat in das HPLC-System injizieren.

Probenstabilität

Bei Raumtemperatur bis zu 3 Tage, bei +2 bis +8 °C bis zu 1 Woche. Es wird empfohlen, die Proben gekühlt zu versenden. Für längere Lagerung (max. 1 Jahr) bei -20 °C einfrieren.

Injektionsvolumen

25 µl (10-50 µl)

Injektionsintervall

12 min

Zusätzliche Informationen

Isokratisches HPLC-System mit UV-Detektor.

Messwellenlänge

265 nm

Autosampler-Spüllösung

Wasser:Acetonitril = 50:50

Hinweis

Bitte beachten Sie, dass die frei zugänglichen Informationen dieser Website, insbesondere auch der Probenvorbereitung, nicht zur Verwendung der Produkte ausreichen. Bitte lesen Sie dazu die Anweisungen und Warnhinweise auf Produkten und/oder in der Arbeitsvorschrift.

Kitkomponenten

Einzeln lieferbare Komponenten

Mobile Phase


Best.-Nr.: 38031

Internal Standard


Best.-Nr.: 38004

Precipitation Reagent


Best.-Nr.: 38005

Wash Buffer 1


Best.-Nr.: 38006

Wash Buffer 2


Best.-Nr.: 38007

Elution Buffer


Best.-Nr.: 38009

Sample Clean Up Columns


Best.-Nr.: 38008

Reaktionsgefäße


Best.-Nr.: 33005

Kalibratoren

Kontrollen

Einzeln lieferbare Kontrollen