Sichere Ergebnisse durch Stabilisierung von FAD
Simultane Bestimmung von FMN
Stabile Kalibratoren und Kontrollen
Riboflavin (Vitamin B2) gehört zum Vitamin-B-Komplex, einer heterogenen Gruppe wasserlöslicher Vitamine, die alle Vorstufen von Coenzymen sind. Aus Riboflavin werden die Coenzyme Flavinadenindinukleotid (FAD) und Flavinmononukleotid (FMN) gebildet, die als prosthetische Gruppe in Flavinenzymen für die Übertragung von Wasserstoff verantwortlich sind. Flavoproteine spielen eine zentrale Rolle in der Atmungskette, im Stoffwechsel der Kohlenhydrate, Fett- und Aminosäuren sowie bei vielen anderen Redox-Reaktionen. Riboflavin ist auch zur Aufrechterhaltung der Glutathionreduktase-Aktivität von entscheidender Bedeutung, wirkt demzufolge indirekt antioxidativ.
Mit der vorliegenden Methode können Riboflavin und seine aktiven Metabolite FAD und FMN im Vollblut unter Verwendung eines isokratischen HPLC-Systems schnell, spezifisch und einfach bestimmt werden. Aufgrund ihrer Eigenfluoreszenz können die Analyte direkt - ohne Derivatisierung - fluorimetrisch detektiert werden. Die Probenvorbereitung beschränkt sich auf eine effektive Proteinfällung direkt nach Zugabe des Extraktionspuffers und eine anschließende Stabilisierung der Analyte. Eine ausgewählte HPLC-Säule und eine für das Trennproblem optimierte mobile Phase erlauben die sichere und zuverlässige Quantifizierung.